北測檢測NTEK工作人員認為這些鄰苯二甲酸酯測試方法能夠測定絕大多數(shù)消費品中六種限制使用的鄰苯二甲酸酯的濃度。某些材料制成的產(chǎn)品可能有必要做出調(diào)整，且應(yīng)當(dāng)以合理的化學(xué)知識和材料科學(xué)以及適合材料的溶劑為基礎(chǔ)。一般的手段是將樣品冷凍粉碎成粉末，在四氫呋喃中將它完全溶解，用己烷將PVC 聚合物沉淀析出，過濾，然后用環(huán)己烷將溶液稀釋，最后采用氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）分析。 

設(shè)備和供應(yīng)品：
樣品制備和分析所使用的材料如下：
1． 四氫呋喃（C4H8O，THF），GC 級或更高
2． 己烷（C6H12），GC 級或更高
3． 環(huán)己烷（C6H12），GC 級或更高
4． 可密封的25 ml 玻璃小瓶，帶PTFE 或硅膠襯里；或類似器皿
5． 冷凍粉碎機（或合適的替代設(shè)備，可以將樣品粉碎）
6． 0.45 μm PTFE 濾紙
7． 安捷倫6890 系列氣相色譜配有DB-5MS 30m×25 mm ID×0.25 μm 色譜柱和5973 質(zhì)量選擇檢測器，或性能相當(dāng)?shù)膬x器。
8． 含有鄰苯二甲酸酯的認證參考材料（例如：NIST SRM 3074）
9． 苯甲酸芐酯（C14H12O2，BB），分析級
10． 鄰苯二甲酸二丁酯（C16H22O4，DBP），CAS No. 84-74-2，分析級
11． 鄰苯二甲酸二（2－乙基己基）酯（C24H38O4，DEHP），CAS No. 117-81-7，分析級
12． 鄰苯二甲酸丁芐酯（C19H20O4，BBP），CAS No. 85-68-7，分析級
13． 鄰苯二甲酸二正辛酯（C24H38O4，DnOP），CAS No. 117-84-0，分析級
14． 鄰苯二甲酸二異壬酯（C26H42O4，DINP），CAS No. 28553-12-0 或68515-48-0，分析級
15． 鄰苯二甲酸二異癸酯（C28H46O4，DIDP），CAS No. 26761-40-0 或68515-49-1，分析級
測定鄰苯二甲酸酯的濃度
這些方法需要使用到有危險性的材料。接觸所有危險性材料均應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進行，并作好充分的個人防護，這是最重要的。鄰苯二甲酸酯是一種常見的污染物。即便是低濃度的污染都可能會影響定量分析結(jié)果。應(yīng)避免與塑膠材料接觸，并且只使用仔細清洗過的玻璃器皿和儀器設(shè)備。所有試劑均應(yīng)測試鄰苯二甲酸酯含量。定期使用GC-MS 分析試劑空白監(jiān)控可能的污染。當(dāng)可行時，建議使用一次性玻璃器皿。
A． 基本制樣方法
1． 從樣品上除去電池、其它的能源或壓縮氣體管，這些均不需要測試或只視作樣品的零件（由于某些電池的內(nèi)部零件，測試電池可能會造成環(huán)境污染和危害人身安全）。稱量樣品。
2． 粉碎/輾碎或其它方式將整個樣品全部粉碎。對于大的樣品或某些非均質(zhì)的零件如印刷線路板，發(fā)動機等，將樣品分步實現(xiàn)粉碎（例如：將樣品在裝有大篩的切割粉碎機中粉碎，然后在帶有小篩的粉碎機中再次粉碎）。粉碎或研磨前可以將樣品在液氮槽中冷卻以提高效率。
3． 確保樣品的粒度為最小，冷凍粉碎機或球磨粉碎機之類的設(shè)備可以將樣品粒度降低到細微的粉末（＜500 μm）。將樣品充分混合。
B． 零部件總量法
1． 將容易拆分的部件從玩具上拆解下來。
2． 稱量每個零部件*。
*備注：某些零件，如未涂漆的金屬、玻璃或陶瓷部件可視作不含鄰苯二甲酸酯，而只需稱重使包括在整個的玩具重量當(dāng)中。
3． 采用上述的基本樣品制備程序?qū)⒚恳粋€零部件（或每組不能夠容易被拆分的非均質(zhì)零件）粉碎成粉末。
4． 在按照方法分析每個零部件后，將各個零部件的結(jié)果統(tǒng)計求出玩具中總的鄰苯二甲酸酯含量。
 
鄰苯二甲酸酯萃取方法
應(yīng)分析三個平行樣。制備樣品同時制作實驗室試劑空白。
1． 稱取至少0.05±0.005 g 樣品放入可密封的玻璃小瓶中（稱量相對誤差不超過±0.5%）；如果樣品為非均勻的，收集更多樣品以減少樣品間差異。
2． 加入5 ml THF 至樣品。對于樣品量超過0.05 g，每0.1 g 樣品加入10 ml THF（或合適的量使樣品溶解*）。震蕩30 分鐘使樣品充分溶解*。
*備注：某些材料可能不完全溶解。在這種情況下，增加樣品震蕩時間兩小時然后繼續(xù)進行下一步。
3． 每5 ml THF（第二步所用）加入10 ml 己烷使PVC 聚合物沉淀析出。至少要靜置5 分鐘使聚合物沉淀析出（為降低在下一步驟中濾紙堵塞的發(fā)生，可增加時間）。
4． 通過0.45 μm PTFE 濾紙過濾溶液。至少收集2 ml 濾液。（如果發(fā)生濾紙堵塞，可能需要重復(fù)更換濾紙直至收集足夠的濾液。）
5． 將0.1 ml 過濾后的THF/己烷溶液與80 μl 內(nèi)標(biāo)（BB，250 μg/ml）混合并加入環(huán)己烷稀釋至20 ml。
*備注：
根椐鄰苯二甲酸酯的濃度，可能需要稀釋不同的倍數(shù)使結(jié)果處于校正范圍內(nèi)（例如：如果已知樣品含有鄰苯二甲酸酯<5%，需將過濾后的THF/己烷溶液由0.1 ml 增加至1 ml。
6． 將稀釋的樣品轉(zhuǎn)移至小瓶中，準(zhǔn)備GC-MS 分析。
GC-MS 操作程序及質(zhì)量控制措施樣品分析建議使用帶有自動進樣器的GC-MS 系統(tǒng)。
 

GC 條件如下（表1）：

色譜柱	DB-5MS；30m×25 mm ID×0.25 μm
載氣速率	1 ml/min，穩(wěn)定氣流（氦氣）
進樣模式	脈沖不分流
進樣量	1 μl
進樣口溫度	29℃
脈沖壓強和時間	35 psi，0.5min
隔墊吹掃速率和時間	20 ml/min，2 min
溶劑延滯	5 min
柱溫箱初始溫度，保留時間	50℃，1 min
程序升溫	1 0℃/min 升溫至280℃
程序升溫	2  15℃/min 升溫至310℃
最終保留時間	4 min

樣品分析采用表2 中的選擇離子監(jiān)控（SIM）模式。在一個通道內(nèi)掃描每種化合物的相關(guān)離子（例如：設(shè)定SIM 第三通道掃描149，167，261，279，293 和307 m/z）。需要注意到儀器之間的保留時間和最佳m/z scan 值有所不同。對于許多儀器，都能夠在單次進樣內(nèi)對檢測器設(shè)定程序?qū)Σ煌ǖ赖母鱾€不同離子進行掃描。
 

表2. SIM 設(shè)定

	保留時間	相關(guān)離子（m/z）
Scan 第一通道:	5 - 9.5 分鐘
BB (內(nèi)標(biāo))	7.93 – 7.99	91.1, 105, 194, 212
DBP	7.93 – 7.99	149, 167, 205, 223
Scan 第二通道:	9.5 - 10.8 分鐘
BBP	9.84 – 9.93
DEHP	10.42 – 10.49	149, 167, 279
Scan 第三通道:	10.8 – 結(jié)束
DnOP	11.15 – 11.24	149, 167, 261, 279
DINP	10.90 – 12.1	149, 167, 293
DIDP	11.20 – 13.00	149, 167, 307

分析
1． 六種目標(biāo)鄰苯二甲酸酯每種至少配制濃度不同（濃度范圍為0.5~10μg/ml）的四個校正標(biāo)準(zhǔn)溶液和一個校正空白（環(huán)己烷）。每個校正標(biāo)準(zhǔn)溶液含1 μg/ml 的內(nèi)標(biāo)。
2． 用GC-MS 分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白。定量分析出結(jié)果，確保合適的保留時間和不受到污染。
3． 對每種標(biāo)準(zhǔn)溶液在兩個波谷之間（時間范圍見表2）進行積分。在第一通道和第二通道掃描的化合物可以通過總離子流圖（TIC）或離子色譜圖（字體加粗的為建議定量離子）進行積分。SIM 第三通道掃描的鄰苯二甲酸酯會重疊且必須使用它們的定量離子（仍然為字體加粗）積分。
4． 根椐規(guī)一化的鄰苯二甲酸酯信號制作校正曲線。規(guī)一化是以鄰苯二甲酸酯信號積分面積除以內(nèi)標(biāo)信號積分面積來實現(xiàn)的。
5． 分析一個認證參考材料（CRM），確保校正是正確無誤的。分析結(jié)果與標(biāo)稱值相差不超過±10%。如果不是，請配制新的標(biāo)準(zhǔn)溶液重新進行校準(zhǔn)。
6． 分析實驗室方法空白和所有的樣品。每隔一段時間分析一個認證參考材料（CRM）進行校準(zhǔn)查核。
7． 量化結(jié)果。如果結(jié)果處于校正范圍外，重新回到鄰苯二甲酸酯萃取第5 步（進行另一次稀釋使結(jié)果處于校正范圍內(nèi)）。

所有目標(biāo)鄰苯二甲酸酯與內(nèi)標(biāo)的總色譜圖

結(jié)果計算：
結(jié)果按照以下公式計算并報告：
[鄰苯二甲酸酯]百分率=%鄰苯二甲酸酯（w/w）=[（C x V x D）/（W x 1000）] x 10
 
上式中：
C=GC-MS 樣品中鄰苯二甲酸酯的濃度
V=鄰苯二甲酸酯萃取第2 步和第3 步加入的THF 和己烷的總體積
D=鄰苯二甲酸酯萃取第5 步的稀釋因子
W=收集樣品的重量（單位mg）
按照上述公式計算出樣品中每一種鄰苯二甲酸酯的濃度

舉例：
50 mg 樣品溶解于5 ml THF 中；接著加入10 ml 己烷（溶劑總體積為15 ml）。過濾，取0.1 ml 濾液與80 μl 內(nèi)標(biāo)混合并用己烷稀釋至20 ml（稀釋因子為200 倍）用于GC-MS 分析。GC-MS 分析結(jié)果DINP 為2 μg/ml，DIDP 為0.5 μg/ml。因此，樣品中含有12%的DINP 和3%的DIDP。

 

W	C	V	D	[（C x V x D）/（W x 1000）] x 100
樣品	GC-MS 測到	初始	稀釋
重量	的DINP 濃度	體積	因子	%DINP（w/w）
50 mg	2 μg/ml	15 ml	20 ml / 0.1 ml = 200	[(2 μg/ml x 15 ml x 200) / (50 mg x 1000 μg/mg)] x 100% = 12%
50 mg	GC-MS 測到 的DIDP 濃度	15 ml	20 ml / 0.1 ml = 200	% DIDP (w//w)
50 mg	0.5 μg/ml	15 ml	20 ml / 0.1 ml = 200	[(0.5 μg/ml x 15 ml x 200) / (50 mg x 1000 μg/mg)] x 100% = 3%